• His标签抗体原料:免疫层析检测His融合蛋白的核心工具

    发布于: 2026-08-31 11:28
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    His标签是目前重组蛋白表达和纯化中最常用的标签之一。。。它由6个连续的组氨酸残基组成。。。组氨酸的咪唑环能与镍离子等过渡金属离子发生特异性螯合,,,,利用这一原理可以通过固定化金属离子亲和层析(IMAC)纯化带有His标签的重组蛋白。。。。

    His标签分子量小(约0.8kDa),,,,通常位于重组蛋白的N端或C端,,不太可能干扰靶蛋白的结构或功能,,,也适合在变性条件下使用。。。。在免疫层析检测中,,,,His标签抗体是识别和捕获His融合蛋白的核心原料。。。。

    一、、、His标签的特点

    His标签由6个组氨酸组成,,,分子量约0.8kDa。。。与其他常用标签(如GST,,,30kDa)相比,,,,尺寸小,,,不太可能干扰靶蛋白的结构或功能。。。。

    His标签可以添加在重组蛋白的N端或C端。。。。由于咪唑环能与固定化的镍离子等金属离子形成配位键,,,His标签广泛用于通过IMAC纯化蛋白。。。His抗体能够识别并特异性结合这些标签序列,,,,可用于检测重组蛋白的表达、、、纯化及定位。。。

    二、、、His抗体在免疫层析平台中的应用(竞争法检测模式)

    竞争法是His标签蛋白检测中最常用的模式。。。。其基本原理如下:

    试纸条结构由样品垫、、、、金标垫、、、NC膜、、、吸水纸和背板组成。。。。试剂卡检测线包被的为带有His-tag的蛋白,,,,对照线包被的为相对应的二抗,,,金垫标记为His抗体。。

    • 阴性样本(不含His标签蛋白):样本通过金标垫时,,金标His抗体随层流移动到检测线位置,,,与固定在T线上的His标签蛋白发生特异性结合,,,,在T线形成条带
    • 阳性样本(含有His标签蛋白):样本中的His标签蛋白与金标His抗体结合,,,,形成“金标抗体-His蛋白”复合物,,,消耗了游离金标抗体。。。剩余的游离金标His抗体越少,,,,到达T线后与固定His蛋白结合的就越少,,,T线显色随之减弱

    阳性样本中His标签蛋白浓度越高,,,T线信号越弱,,直至消线。。。。无论样本中是否存在His标签蛋白,,,,都会向上层析至C线,,,,与包被在C线的二抗反应形成条带,,,,用于判断层析过程是否正常。。。

    竞争法的适用场景:竞争法适用于检测重组蛋白的His标签融合蛋白表达产物。。。可以用于检测细胞培养上清、、、细胞/细菌裂解产物或蛋白纯化后的His标签蛋白。。。。

    三、、、、产品优势

    • 高特异性识别

    • 高纯度与低批次间差异

    • 免疫层析平台适配性

    • 多种应用模式支持

    四、、客户应用反馈

    使用博梵Biofonnx his抗体,,制备His标签检测卡,,,搭配胶体金免疫分析仪在蛋白表达和纯化上的应用案例

    实验结果:尊龙时凯His抗体原料在竞争法检测模式下,,,,T线信号随浓度升高呈现梯度减弱趋势。。该抗体原料检测梯度清晰、、、消线明显,,可用于His融合蛋白表达检测等应用场景。。。

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